Исследование причин сепсиса у животных

• Желательно получать пробы крови перед началом подъема температуры.
• Кровь забирается до начала антибактериального лечения или перед очередным введением препарата (во время наименьшей концентрации антибиотика в интервале дозирования).
• Не следует брать кровь из сосудистых катетеров, кроме случаев, когда предполагается катетер-ассоциированная инфекция кровотока.
• Объем собранной крови является наиболее важным для получения достоверного результата. Использование меньшего объема образца может исказить результаты выделения и/или увеличить время обнаружения некоторых микроорганизмов.
• Рекомендованы 2-3-кратные исследования с интервалом 30–60 минут, что увеличивает процент положительных результатов исследований.
• Флаконы должны быть комнатной температуры. Перед взятием крови необходимо промаркировать флаконы.

Как правильно брать кровь на посев?

1. С крышки флакона удалить пластиковую защитную пластину и продезинфицировать пробку 70% спиртом. Дождаться полного высыхания.
2. Выстричь шерсть над выбранным для пункции сосудом, участок кожи продезинфицировать 70% спиртом. Дождаться, пока высохнет обработанный участок кожи. Не допускается пальпировать сосуд после обработки кожи перед введением иглы.
3. Пробы крови получают венепункцией периферических вен одноразовым шприцем или с использованием системы забора крови с соблюдением правил асептики. При использовании шприца необходимо поменять иглу перед внесением биоматериала во флаконы.
4. Внесение биоматериала во флаконы:
При использовании системы из 2х флаконов сначала нужно вносить образец во флакон для выделения анаэробных микроорганизмов (синяя крышка), а затем - во флакон для выделения аэробных микроорганизмов (зеленая/красная крышка).
При использовании системы из 1-го флакона внести весь образец в аэробный флакон (зеленая/красная крышка).

Для оценки количества внесенного образца используются метки объема на этикетке флакона.
5. После внесения крови во флакон, осторожно, не отрывая дно флакона от поверхности стола, вращательным движением перемешать его содержимое для предотвращения свертывания крови.

Как хранить и транспортировать инокулированные флаконы?

• Температура хранения и транспортировки +20…+25, общее время хранения и транспортировки не более 6 часов с момента взятия материала. Не хранить в холодильнике! Не хранить в термостате!
• Так как кровь часто забирается у животных в критическом состоянии, допустимо сразу после взятия крови вызвать курьера лаборатории.

Какие биоматериалы, кроме крови, можно забрать на исследование при сепсисе?

Микробиологическое исследование источника бактериемии рекомендуется:

• при пневмонии - отделяемое НДП (мокрота, БАЛ и др.),
• при пиелонефрите - моча (цистоцентез),
• при интраабдоминальной или раневой инфекции - посев раневого отделяемого,
• при менингите - посев ликвора.

Что нужно знать при интерпретации результатов посева крови:

Как отличить контаминант от истинного патогена?

На протяжении многих лет ряд исследований помог нам получить информацию о том, какие микроорганизмы с наибольшей вероятностью представляют контаминацию при выделении из крови. К ним относятся большинство видов коагулазонегативных стафилококков (CoNS), большинство видов Corynebacterium и родственных родов, Bacillus spp., кроме Bacillus anthracis, Micrococcus spp. и Cutibacterium acnes и родственные виды. Эти микроорганизмы могут считаться контаминантами, если они выделены в одном флаконе из нескольких гемокультур, полученных последовательно, и в этом случае для определения значимости (или ее отсутствия) требуется тщательная оценка пациентов и дополнительная лабораторная информация. Энтерококки, стрептококки группы viridans (кроме случаев эндокардита) и Clostridium spp. имеют различную клиническую значимость (т. е. могут быть либо контаминантами, либо истинными патогенами) при росте из культур крови.

Напротив, микроорганизмы, такие как Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, бета-гемолитические стрептококки, Listeria monocytogenes, Escherichia coli и другие представители Enterobacterales, Pseudomonas aeruginosa, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, анаэробные грамотрицательные палочки (например, Bacteroides spp. и Fusobacterium spp.) и виды Candida редко представляют контаминацию = могут быть этиологически значимыми.

Критериями контаминации могут служить:

• Вид микроорганизма (Streptococcus viridans group, кроме случаев эндокардита; CoNS – при наличии других признаков контаминации; Bacillus spp., кроме Bacillus anthracis (облигатный патоген), Bacillus cereus, Bacillus subtilis - при наличии других признаков контаминации; Corynebacterium spp., кроме C. jeikium)
• Рост перечисленных микроорганизма (см.выше) в одном флаконе из 2-х и более
• Замедленная скорость роста (кроме истинно медленнорастущих микроорганизмов)
• Наличие бактериемии при отсутствии других критериев сепсиса